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Intro ......

 

1ml acetone 1회 washinl e.W, Centrifuge, spectro-20, 비커,8 e..3ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다.5ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다.0 1. pptf,, D.2mg/ml (3) e. (1) c x축 표준용액(1mg/1ml) 0.6 0. 혈청 0. free cholesterol 양 = 0. 0. 콜레스테롤(cholesterol)은 마치 양초의 기름같은 것이라고 말할 수 있으며 유리형(free type)과 에스테르형(ester type)이 있다. METHOD 1.2 0.5 썩어 3000rpm 5min 원심분리 b.1 0.85 ∞ (2) . , 5분 원심분리 c. A550에서 흡광도 측정 g.5ml + ethylacetate ethanol 5ml를 섞는다. 3000rpm 5min centrifuge d. b.5 1.5 4 3. acetone 완전히 제거후 ethylacetate 0. cholesterol 총량 = 0.5ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다. f. 약 3000rpm 5min가 원심 분리 3. 흡광도 = 0. A550에서 흡광도 측정 d.1 0.5 ethylacetate -etanol(ml) 4. 표준용액(1mg/ml) 0.25 y축 (흡광도) 0. (3) free cholesterol 양 측정 a.05 0. 흡광도 = 0. sup. (1) cholesterol standard curve 작성 a ......

 

 

Index & Contents

콜레스테롤실험

 

콜레스테롤실험

 

2. MATERIAL

 

Tip, Pippet, Test tube, spectro-20, D.W, 비커, Centrifuge, Fecl3, H2SO4, Ethylacetate ethanol, 삼각플리스크, Tritonx-100, cleanbanch

 

3. METHOD

 

1. 혈액을 상온에서 응고될때까지 기다린 후 냉장고에서 냉각

2. 약 3000rpm 5min가 원심 분리

3. sup만 따로 모은다.

(1) cholesterol standard curve 작성

a.

 

표준용액(1mg/ml)

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

ethylacetate

-etanol(ml)

4.5

4

3.5

3.0

2.5

 

 

썩어 3000rpm 5min 원심분리

b. sup. 0.5ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다.

c. A550에서 흡광도 측정

d. standard curve 작성

(2) cholesterol 총량

a. 혈청 0.5ml + ethylacetate ethanol 5ml를 섞는다.

b. 3000rpm, 5분 원심분리

c. sup. 0.5ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다.

 

(3) free cholesterol 양 측정

a. (2) 추출액 0.6ml + Tritonx-100 2ml을 섞는다.

b. 10분간 상온에서 incubation

c. 3000rpm 5min centrifuge

d. pptf,f 1ml acetone 1회 washinl

e. acetone 완전히 제거후 ethylacetate 0.3ml + Fecl3 1ml + H2SO4 1ml을 섞는다.

f. A550에서 흡광도 측정

g. 양 측정

 

4. RESULT

3. (1) c

x축 표준용액(1mg/1ml)

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

y축 (흡광도)

0.1

0.43

0.6

0.85

∞

 

(2) d. 흡광도 = 0.08

e. cholesterol 총량 = 0.2mg/ml

(3) e. 흡광도 = 0.06

f. free cholesterol 양 = 0.15mg/ml

 

5. DISCUSSION

 

이번 실험은 표준 용액 cholesterol ethylaceteate-ethanol으로 standard curve를 작성하여 ester type와 free type의 흡광도 측정과 양 측정을 하는 것이었다.

콜레스테롤(cholesterol)은 마치 양초의 기름같은 것이라고 말할 수 있으며 유리형(free type)과 에스테르형(ester type)이 있다. 유리형 콜레스테롤은 각조직에 운반되어 일부는 세포막 구성에 사용되고 여분의 콜레스테롤은 다

 

 

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