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Intro ......

 

검출기 및 분광광도계 여러 부위에서 필요한 안정된 전원을 공급하는 장치, 슬릿의 폭 조절 장치, 회절 격자 혹은 프리즘으로 이루어진 단색광 장치에 의해 백색광을 파장별로 분류하여 Reference와 Sample을 통과한 후 검출기에서 검출된다. 잘 보면 약간 불투명한 부분과 완전투명한 부분이 있을 겁니다. 켠 다음 바로 사용되지는 않을 겁니다. 자외-가시광에 대하여 투명한 석영으로 만든 관(cuvette)이 가장 널리 사용되는데, 응답시간, 가시부의 광원은 텅스텐 필라멘트 전구가 일반적이다. 워밍업이 끝나면 2) 사용할 파장을 정해줍니. , 자외/가시부 전체 스펙트럼 영역을 매우 짧은 시간(수 ms)에 얻을 수 있는 광다이오드 어레이(photodiode array)나 CCD(Charge Coupled Device) 등도 개발되어 사용되고 있다. 이 때 시료 용액을 담는 용기는 측정하고자 하는 파장의 빛을 흡수하지 않아야 한다. 레이저 기술의 발전으로 285-400nm 범위에서 연속된 스펙트럼을 발생시킬 수 있는 색소 레이저(dye laser)도 광원으로  ......

 

 

Index & Contents

uv기기및조작법

 

uv기기및조작법

 

UV-Vis Spectroscope의 실제 형태는 매우 다양하지만 기본적인 구성요소는 비슷하다. 최근 많이 이용되는 Double-Beam UV-Vis Spectrophotometer의 구조는 아래와 같다.

 

 

 

 

 

 

Single-Beam UV-Vis Spectrophotometer에서 각각의 파장에서 시료와 용매의 흡광도는 수동으로 측정해야 한다. (Beer-Lambert Law 참조) 그러나 위 그림의 double-beam design은 시료와 용매의 흡광도를 동시에 측정함으로써 편의성을 현저히 개선하였다.

 

광원의 빛은 자외-가시광의 모든 파장 성분을 포함하는 백색광이며, 회절 격자 혹은 프리즘으로 이루어진 단색광 장치에 의해 백색광을 파장별로 분류하여 Reference와 Sample을 통과한 후 검출기에서 검출된다.

 

　

 

광원(Light Source)

 

광원의 역할은 적절한 파장의 빛을 시료 물질과 상호작용 후에도 측정이 가능할 정도로 충분한 강도로 발생시키는 것이다. 보통 자외부의 광원은 중수소 아크(deuterium arc), 수은 및 제논 아크(mercury and xenon arcs) 등이 사용되고, 가시부의 광원은 텅스텐 필라멘트 전구가 일반적이다. 레이저 기술의 발전으로 285-400nm 범위에서 연속된 스펙트럼을 발생시킬 수 있는 색소 레이저(dye laser)도 광원으로 활용되고 있다. (Radiation Source 참조)

 

단색광기

 

광원으로부터 나오는 빛은 여러 파장의 빛이 섞여 있기 때문에 특정 파장의 빛으로 분리해야 한다. 단색광기(monochromator)는 프리즘(prizm)이나 회절격자(deffraction grating)를 이용하여 빛을 분리하고, 단색광기의 입구나 출구에 슬릿(slit), 렌즈, 거울 등을 보조적으로 사용하여 특정 파장의 빛을 선택한다. 일부 기기에서는 특정 파장의 빛 만을 통과시키는 필터를 사용하여 빛을 선택하기도 한다. (Wavelength Selector 참조)

 

시료장착부

 

시료장착부(sample compartment)는 시료를 빛의 통로에 올려 놓는 부위로서 시료가 특성에 따라 적절한 시료 용기(cell) 또는 악세사리가 사용된다. 이 때 시료 용액을 담는 용기는 측정하고자 하는 파장의 빛을 흡수하지 않아야 한다. 자외-가시광에 대하여 투명한 석영으로 만든 관(cuvette)이 가장 널리 사용되는데, 빛의 통과 거리가 0.1 cm, 0.5 cm, 1.0 cm 등이 되도록 제작되어 있다. 경우에 따라 온도 조절기나 자동 시료 교환 장치 등을 시료장착부에 설치하기도 한다. (Cuvette 참조)

 

검출기

 

빛이 시료를 통과하기 전과 후의 빛의 강도를 측정함으로써 시료가 흡수한 빛의 양을 측정하는 부위가 검출기(detecter)이다. 자외선/가시광선 범위의 빛을 검출하는 검출기에는 보통 3가지 종류가 있으며 이들은 각각 감도, 응답시간, 사용되는 파장범위 및 출력의 형태 등에 따라 차이점을 갖고 있다. 대부분의 기기에서는 광전증배관(photo multiplier tube) 또는 광전관(phototube)이 사용되고 있으며, 광전자발생관(photoemissive tube) 및 PbS cell과 같은 광전장치(photoconductive device), 자외/가시부 전체 스펙트럼 영역을 매우 짧은 시간(수 ms)에 얻을 수 있는 광다이오드 어레이(photodiode array)나 CCD(Charge Coupled Device) 등도 개발되어 사용되고 있다.

 

 

 

 

광학부

 

광학부(optical components)는 광원으로부터 나온 빛이 단색광기와 시료를 거쳐 최종 검출기까지 이를 수 있도록 유도하는 부위이다. 여기에는 렌즈, 거울, 광분배기(beam splitter), 초퍼(chopper), 슬릿(slit), 창(windows) 등의 광학 장치들이 사용되는데, 빛이 광원으로부터 단색광기, 시료를 거쳐 검출기로 가능한 많은 양이 공간적으로 작은 부위에 집중적으로 전달될 수 있도록 한다.

 

전자, 전기 및 기계 장치

 

분광광도계에는 광원, 검출기 및 분광광도계 여러 부위에서 필요한 안정된 전원을 공급하는 장치, 단생광기 구동 장치, 슬릿의 폭 조절 장치, 시료부 제어 장치 등 여러 전기적 기계적 장치가 필요하다.

 

결과 표시부

 

얻어진 결과를 적절한 형태로 표시할 수 있는 장치 및 부가적인 연산을 위한 컴퓨터 자료 처리 시스템, 프린터도 분광광도계의 중요한 구성 요소가 된다.

[출처] UV-Vis : 기기구성|작성자 밝은햇살

 

<조작법>

[준비]

 

일단 UV-Vis spectrophotometer 전원을 켠 다음 1) 5분에서 10분동안 워밍업을 시킵니다. 켠 다음 바로 사용되지는 않을 겁니다. 기계자체가 이것저것 분석하는데 시간이 걸립니다.

 

-일반적으로 워밍업은 안전하게 15분으로 알고 있으나, 10분 정도면 충분하리라 생각함.

 

-실험실에 들어가서 준비 시 미리 전원을 켜 놓은 것이 좋을 듯.

 

 

 

기본적인 방법은 이렇습니다. 워밍업이 끝나면 2) 사용할 파장을 정해줍니다. 기계마다 달라서 파장의 범위가 넓은 것도 있고 좁은 것도 있지만 UV영역과 Visible영역이 모두 되는 거라고 가정하에 설명드리면 우선 [UV영역의 파장을 사용할 것인지 Visible영역을 사용할 것인지 정한 후에 wavelenth수치를 입력한 후에 파장표시버튼을 누르면 기계에서 그 파장의 광선을 이용하게 ]됩니다.

 

-bradford분석법은 595nm 파장을 이용하므로 595에 맞추는 것.

 

 

 

[보정하기]

 

다음 준비하고자 하는 샘플[보정하기 위한 샘플]의 3) OD값을 측정하기 위해서 Cuvette에 넣습니다. 잘 보면 약간 불투명한 부분과 완전투명한 부분이 있을 겁니다. 투명한 부분이 광원과 마주보도록 넣어줘야 합니다. 그리고 손으로 투명한 부분을 만지면 안됩니다. cuvette을 다룰 경우에는 불투명한 부분을 집도록 하세요.

 

기준이 되

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